本发明提供了一种室内鉴定拟轮枝镰孢菌致病力的方法，属于玉米病害防治技术领域，所述方法包括以下步骤：1）将拟轮枝镰孢菌室内培养，得到拟轮枝镰孢菌单菌落；2）沿步骤1）所述拟轮枝镰孢菌单菌落外缘切下带菌培养基块，得到菌饼；3）取新鲜玉米花丝平行帖放于步骤2）所述菌饼上，密封静置5~9d，观察玉米花丝的发病情况，确定拟轮枝镰孢菌致病力。该方法在室内操作，操作过程简单，工作量小，能够节省人力资源；并且在实施过程中，温度和湿度容易控制，不易受外界环境影响，实验结果准确，稳定，可靠，误差低。经过验证，本发明的鉴定结果与大田致病力鉴定结果一致